Микозы. Плесневые и дрожжеподобные грибы.
Плесневые и дрожжеподобные грибы.
Из 100 000 грибов патогенными являются для человека около 500 видов.
Класс Zygomycetus: р. Anizopus и р. Mucor ( вызывают инфаркт миокарда)
Класс Ascomycetus: р. Aspergillium 10 видов и р. Penicyllium ( можно обнаружить в ротовой полости)
Класс Furarium: р. Gladosporium и р. Cephalosporium (вызывают клинику рака)
1.Классификация:
- плесневые грибы
- дрожжеподобные грибы
2.По локализации:
*Сапрфитии: разноцветный лишай, узловатая трихоспория
*Эпидермофитии
*Кандидомикозы («молочница», кандидоз, кандидиоз)
*Глубокие микозы:
- бластомикоз
- криптококкоз
- гистоплазмоз
- аспергиллез
- рубромикоз
- кокцидиомикоз (- идоз)
3.По спорообразованию:
* ОО-mycetus (Оо- спора, неравные клетки, половой путь размножения)
в основном водные сапрофиты.
* Zygomycetus (оо- зигоспора. Слияние чужих или своих половым путем)
В основном почвенные сапрофиты. Споры неподвижны, являются паразитами насекомых, червей.
* Ascomycetus (аск – «мешочек» с 8-мью спорами, возбудители для человека и животных). Включает р. Aspergillium 10 видов р. Penicyllium
* Basidiomycetus – высокотоксичны для человека.
* Deuteromycetus – ( несовершенные грибы, вегетативное размножение спор.
К ним относятся часто высокопатогенные грибы: кожные оо-микозы, кандидозы).
Виды спор
- Конидии (эктоспоры) у плесневых грибов делят на
* Микро- споры, которые бывают поодиночке или небольшими группами)
* Макро- споры, крупные образования с перегородками в клетках ( походят на «бананы»), характерны для дерматомикозов.
- Бластоспоры образуются у дрожжеподобных грибов.
- Артроспоры – как суставы, необходимы для рассеивания у оо- микозов.
При особо плотной оболочке их называют хламидоспоры, которые необходимы грибу для длительного хранения.
- Эндоспоры располагаются в теле гриба, как у бактерий.
Мицелий грибов
- Истинный мицелий у плесневых грибов
- Псевдомицелий у дрожжеподобных, у которых клетки внутри связаны.
Конец нити мицелия является видовым признаком, бывают различными завитушками, в виде спирали и др.
Различны также и формы грибов: на коже грибы растут с ответвлениями, при дисбактериозах кишечника грибы резко выражены, с перегородками (септами).
Деление грибов происходит с помощью:
а) почкования б) простой перетяжки.
Клиника заболевания разнообразна:
1группа: — микроспория волосистой части головы
— поражение ногтей
— дерматиты
— риниты
— наружный слуховой проход, отиты
— септические состояния
— нарушение функций опорно-двигательного аппарата
— бронхолегочный аспергиллез
2 группа: аллергические состояния ( астма и другие проявления)
3 группа: микотоксикозы, вызываемые следующими токсинами
— микотоксин, который выделяется проросшим зерном после зимнего пребывания на поле. Вызывает такое зерно некротическую ангину, которая через 2-3 недели заканчивается чаще всего летальным исходом.
— афлотоксин, выделяемый бобовыми, арахисовыми культурами, можно обнаружить в сухом молоке, картофеле. В США была вспышка заболеваний, вызванная потреблением продуктов животного происхождения, полученных после их кормления арахисовым жмыхом, привезенным из Вьетнама. Причина летальных исходов – цирроз печени, так как токсины плесневых грибов не разрушаются, а только кумулируют (накапливаются) в печени.
— зеаренон, для человека не опасен, а у животных вызывает аборты.
— охротоксин вызывает некроз почек человека.
Способны к токсинообразованию около 5% грибов.
Пути и источники инфицирования:
— продукты (сладкий творог)
— объекты окружающей среды
— в роддомах предметы обихода, родовые пути, плохо обработанные соски, ножницы.
Кроме того широко распространено носительство микозов как у человека, так и у животных.
Группы риска
1группа: — новорожденные дети и дети младшего возраста
— онкобольные
— люди с иммунодефицитами
— больные СПИДом
— ожоговые больные
— пораженные радиацией (лучевая болезнь)
— больные диабетом
— люди, принимающие антибиотики широкого спектра действия.
2 группа – профилактические заболевания:
— работники сельского хозяйства
— микробиологической промышленности
— производство антибиотиков
— кондитерские предприятия
— табачная промышленность
— артисты балета
— работники угольной промышленности.
Лабораторная диагностика
Для работы с грибами создаются специальные лаборатории или выделяются отдельные помещения, так как работа с грибами требует самого осторожного обращения с исследуемым материалом ввиду «летучести» спор грибов. Необходимы также самые тщательные меры индивидуальной защиты работников лаборатории.
Для проведения исследования применяются следующие методы:
- Микроскопический
- Микологический
- Гистологический.
- Экспериментальный.
- Иммунологический (серологические реакции, аллергические пробы).
- Биохимический.
- Электронно-микроскопический.
Отбор материала
Очаги поражения должны быть свежие и сформированные.
- Все выделения человека (кровь, ликвор, мокрота, моча, желчь, испражнения, слизь), отделяемое гнойных ран, кусочки ткани, трупный материал.
- Срезы кожи со стопы больного.
- Кусочки ногтей.
- Пораженные волосы.
Отбирается материал специальной стерильной лопаточкой с помощью пинцета в стерильную удобную емкость или непергаментную стерильную бумагу, чтобы при разворачивании ее в лаборатории ничего не «летело» вверх. Лучше помещать материал в стерильную чашку Петри или между 2-мя стеклами.
Микроскопия исследуемого материала предусматривает просмотр минимум 4-рех препаратов:
- Нативного при малом увеличении *40
- Окрашенного по Грамму (для просмотра сопутствующей микрофлоры)
- Окрашенного по Гимза-Романовскому (для дифференциации хламидиями).
- Окрашенного по Циль-Нильсену (для дифференциации с микобактериями).
Просмотр нативных мазков целесообразен при полном просветлении, для чего в исследуемый грубый материал добавляют 10% -20% раствор КОН и оставляют на 1-2 часа, если же корки очень толстые, то и на всю ночь.
Оценка результатов:
- Наблюдаем в поле зрения большое количество почкующихся клеток.
Вывод: состояние сапрофитического носительства.
- Наблюдаем в поле зрения почкующиеся клетки и нити мицелия.
Вывод: гриб готовится к переходу в паразитарное состояние.
- Наблюдаем в поле зрения единичные клетки и вокруг много нитей мицелия. Вывод: гриб перешел в паразитарное состояние.
Нити мицелия бесцветны, а окраску дают споры гриба, располагающиеся сверху. Если виден пигмент, то это более сильные продуценты биологических веществ.
Культивирование грибов
Для роста и размножения грибов необходим азот, который поступает из мясных переваров. Источником углерода служит все, где он имеется: спирты, углеводы, пчелиный мед, кератин кожи, моркови.
Питательные среды, применяемые для выращивания грибов:
1 – сывороточный агар
2- рисовый агар
3 – кровяной агар
4- охмеленное сусло, используемое в пивоварении
5- картофельный агар
6- жидкая и плотная среда Сабуро.
Приготовление сред производится на водопроводной воде, из которой поступают в среду микроэлементы и витамины; рН сред от 3,0 до 9,0. Оптимальная рН 6,0 – 6,5; если менее или более этих величин, то происходит накопление токсина. Температурный рост при 37град., мицелиальные формы растут при 22 -28 град. Рост на средах: — глубинный
— поверхностный
— воздушный
Дрожжеподобные грибы р. Candida.
Дрожжеподобных грибов насчитывается около 195 видов, встречаются они повсюду: вода питьевая, вода открытых водоемов (до 17 видов), почва, стерня после уборки зерновых культур, травяной покос.
Размножаются при помощи бластоспор; имеют 2 антигена, поэтому возможно определение титра антител в динамике, который у здоровых людей 1:4 – 1:20,
а при поражении слизистых оболочек 1:20 – 1: 320 и при генерализованных процессах 1:200 – 1: 3200. Наиболее распространенные виды:
- albicans – патогенный вид для человека
- tropicalis
- crusei
- pseudotropicalis
- quilliermondi
- brumpti и др.
Здоровое носительство C. albicans у людей в полости рта встречается у 20-60%,
в микрофлоре кишечника у 20-50% ; слизистая влагалища небеременной женщины у 10-17%, а у беременной у 25-33%.
Таким образом, обнаружение грибов р. Candida со слизистых оболочек от 10 до 100 клеток в мл,гр; в желудочном содержимом от 100 до 300 клеток в мл,гр; в мокроте от 10 до 50 клеток в мл,гр; в испражнениях от 100 до 300 клеток в мл,гр. считается нормой.
Материал для исследования: кровь, ликвор, мокрота, моча, желчь, испражнения, мазок со слизистых, отделяемое гнойных ран, кусочки ткани, трупный материал. Отбор проб для исследования по общим правилам.
Учитывая здоровое носительство, а значит и необходимость правильной оценки полученных результатов, рекомендуется применять 3-х кратное обследование и количественный метод посева.
Наиболее распространенная среда, применяемая для выявления роста и размножения грибов р. Candida – жидкая и плотная Сабуро. В жидкой наблюдается придонно-пристеночный рост белого цвета, а на чашках с плотной средой рост сметанообразных колоний с запахом дрожжей. При микроскопии мазка с такой колонии видим Грамм + крупные почкующиеся клетки.
После подсчета выросших колоний и их дифференциации с сапрофитами,
изучения биохимических свойств, полной идентификации выделенного возбудителя выдается ответ с указанием препаратов для лечения больного, если выявлен патологический процесс.
Отмечается патология в тех случаях, когда в высеве со слизистой наблюдается рост 1000 и более клеток в мл,гр; более 500 в мокроте; более 1000 клеток в мл,гр в испражнениях; более 300 в желчи и в дуоденальном содержимом; более 10 000 клеток в мл,гр в моче.
Лечение проводится препаратами, к которым чувствителен выделенный возбудитель. Определение чувствительности осуществляется диско-диффузионным методом с помощью специального набора, содержащего противогрибковые препараты. Нужно помнить, что иод не убивает, а только задерживает рост и размножение грибов.
Борьба с плесневыми грибами в подвалах, при дезинфекционной обработке требует определенных правил и усилий.
Препараты могут быть использованы как в форме мазей, присыпок, примочек так в таблетках, капсулах. В современной фармакологии выбор достаточен, однако необходимо всегда помнить, что самолечение не самый эффективный способ помочь себе и близким.